Grupos de investigación - ENFERMEDADES INFECCIOSAS

Laboratorio de Referencia e Investigación en Infecciones Virales Inmunoprevenibles. Grupo de Infecciones Víricas e Inmunidad en Enfermos Inmunodeprimidos


Página web del grupo: https://www.isciii.es/QueHacemos/Investigacion/EnfermedadesInfecciosas/Paginas/Detalle.aspx?ItemId=37

Investigador responsable: Pilar Pérez Romero. mpperez@isciii.es

Entidad: Instituto de Salud Carlos III. CNM

Investigadores:

  • Ana Castellanos Nadal. CNM. ISCIII
  • Estefanía García Ríos. CNM. ISCIII
  • Francisco Mancebo Pascual. CNM. ISCIII
  • Marcos Nuévalos Guaita. UCM

Las actividades de nuestro grupo se centran en el estudio de la infección viral y de la inducción de la respuesta inmune frente a infecciones víricas en individuos inmunocomprometidos, para el desarrollo de alternativas diagnósticas para predecir la infección y preventivas a través del desarrollo de vacunas. Trabajamos en las siguientes líneas de investigación:

  • Caracterización de la respuesta inmune (celular y humoral) protectora frente a la infección por citomegalovirus (CMV). Marcadores inmunológicos y virológicos de inducción de protección frente a la infección.
  • Desarrollo preclínico de vacunas (antígenos proteicos y vacunas de DNA) frente a la infección por CMV.
  • Desarrollo preclínico de anticuerpos monoclonales para la prevención y tratamiento de la infección por CMV.
  • Estudio de la respuesta de anticuerpos neutralizantes frente a CoV-2 y desarrollo de vacunas.
  • SARSVAX: Development of a multi-epitope vaccine for SARS-CoV-2 using the PLASMIVAX vaccine platform. Fundación La Caixa. Financiación: 300.000€. Duración: 2020-2021.
  • Estudio de la cinética y reactividad de los anticuerpos neutralizantes en pacientes recuperados de COVID-19. Fundación Mutua Madrileña. Financiación: 80.000€. Duración: 2020-2021.
  • STOP-Coronavirus: factores clínicos, inmunológicos, genómicos, virológicos y bioéticos de COVID-19. ISCIII (Convocatoria de proyectos de investigación sobre el SARSCOV-2 y la enfermedad COVID19). Expediente: COV20-00181. Financiación: 1.200.000€. Duración: 2020-2021.
  • Coordinación de actividades de investigación en el CNM para realizar una respuesta integradora frente a la pandemia por SARS-CoV2 en España. ISCIII (Convocatoria de proyectos de investigación sobre el SARSCOV- 2 y la enfermedad COVID19).Expediente: MPY222/20. Financiación: 325.909,46€. Duración: 2020-2021.
  • Desarrollo preclínico de vacunas de ADN frente a CMV a través de análisis inmunogénico del proteoma completo de CMV. ISCIII (Proyecto de Desarrollo Tecnológico). Expediente: DTS18CIII/00005. Financiación: 98.400 €. Duración: 2019-2021.
  • Score integrado de factores inmunológicos y genotípicos de predicción del riesgo y evolución de la infección por CMV en pacientes con trasplante renal. ISCIII (AESI) Expediente: P17CIII/00016. Financiación: 94.700 €. Duración: 2018-2021.
  • In-vitro activity of the combination of Letermovir and Sirolimus against Cytomegalovirus (CMV). MERCK Investigator Iniciated Study Program IISP/19. Financiación: 46.000 €. Duración: 2019-2020.
  • Investigación de anticuerpos frente a Acinetobacter baumannii. Vaxdyn S.L. Expediente: MVP 210/18. Financiación: 40.400 €. Duración: 2018-2020.
  • Sandonís V, García-Ríos E, McConnell MJ, Pérez-Romero P. Role of Neutralizing Antibodies in CMV Infection: Implications for New Therapeutic Approaches. Trends Microbiol. 2020 May 6:S0966-842X(20)30092-5. doi: 10.1016/j.tim.2020.04.003. IF: 13.546 / MICROBIOLOGY / D1.
  • Navarro D, Fernández-Ruiz M, Aguado JM, Sandonís V, Pérez-Romero P. Going beyond serology for stratifying the risk of CMV infection in transplant recipients. Rev Med Virol. 2019 Jan;29(1):e2017. doi: 10.1002/rmv.2017. IF: 4.221 / VIROLOGY / Q1.
  • Molina-Ortega A, Martín-Gandul C, Mena-Romo JD, Rodríguez-Hernández MJ, Suñer M, Bernal C, Sánchez M, Sánchez-Céspedes J, Pérez Romero P*, Cordero E. Impact of pretransplant CMV-specific T-cell immune response in the control of CMV infection after solid organ transplantation: a prospective cohort study. Clin Microbiol Infect. 2019 Jun;25(6):753-758. doi: 10.1016/j.cmi.2018.09.019. *Corresponding. FI: 7.117 / INFECTIOUS DISEASES / D1.
  • Cordero E, Roca-Oporto C, Bulnes-Ramos A, Aydillo T, Gavaldà J, Moreno A, Torre-Cisneros J, Montejo JM, Fortun J, Muñoz P, Sabé N, Fariñas MC, Blanes-Julia M, López-Medrano F, Suárez-Benjumea A, Martinez-Atienza J, Rosso-Fernández C, Pérez-Romero P. Two Doses of Inactivated Influenza Vaccine Improve Immune Response in Solid Organ Transplant Recipients: Results of TRANSGRIPE 1-2, a Randomized Controlled Clinical Trial. Clin Infect Dis. 2017 Apr 1;64(7):829-838. doi: 10.1093/cid/ciw855. FI:  117 / INFECTIOUS DISEASES / D1.
  • Blanco-Lobo P, Cordero E, Martín-Gandul C, Gentil MA, Suárez-Artacho G, Sobrino M, Aznar J, Pérez-Romero P. Use of antibodies neutralizing epithelial cell infection to diagnose patients at risk for CMV Disease after transplantation. J Infect. 2016 May;72(5):597-607. doi: 10.1016/j.jinf.2016.02.008. FI: 4.201 / INFECTIOUS DISEASES / Q1.

Manejo de técnicas aplicadas al estudio de poblaciones víricas. Entre las técnicas desarrolladas estarán las siguientes:

  • Mantenimiento y propagación de líneas celulares en cultivos para el estudio de la replicación viral.
  • Propagación y purificación de partículas y estructuras virales.
  • Producción y titulación de stocks virales.
  • Estudio de niveles de viremia por métodos cualitativos y cuantitativos.

Manejo de técnicas de Biología Molecular:

  • Aislamiento y amplificación de material genético para el diagnóstico virológico, por PCR convencional y cuantitativa.
  • Clonación de genes en plásmidos y secuenciación de material genético.
  • Manipulación del material genético mediante mutagénesis dirigida.
  • Transformación de bacterias en cultivo y selección de clones.
  • Monitorización de la expresión de proteínas, a través de Western blot, ELISA y luminometría.
  • Generación de mutantes por recombinación homóloga.
  • Generación de pseudovirus.

Manejo de técnicas de Biología Celular:

  • Mantenimiento y propagación de líneas celulares en cultivo.
  • Transfecciones de líneas celulares y seguimiento de la expresión de las proteínas intracelulares.

Manejo de técnicas de Inmunología:

  • Estimulación in vitro de células T.
  • Determinación de marcadores celulares por citometría de flujo.
  • Determinación de la respuesta inmune humoral: detección de anticuerpos por ELISA, y anticuerpos neutralizantes por microneutralización, ensayo de citotoxicidad mediada por anticuerpos.

Experimentación animal:

  • Manipulación y realización de procedimientos en ratones. Inmunización y monitorización de ratones, recogida y análisis de muestras de sangre y tejidos.
  • Para llevar a cabo estas actividades se dispone del espacio apropiado, incluyendo zonas de laboratorio con instalaciones de investigación y diagnóstico y espacios con el equipamiento necesario para la actividad del laboratorio de Virología.
  • El laboratorio incluye un área de seguridad habilitada para el cultivo de líneas celulares y manejo de virus, área de electroforesis de ADN y proteínas, y un área de manipulación y amplificación de DNA, entre otros.
  • Además, la planta de Virología está equipada con salas con puestos de trabajo con ordenadores así como áreas destinadas a reuniones de trabajo.
  • Asimismo, el Centro cuenta con servicios comunes de apoyo a la investigación necesarios para la investigación propuesta entre los que utilizaremos para la actividad propuesta los siguientes: Servicio de Citometría de flujo, Microscopía óptica, Microscopía electrónica, Servicio de Genómica e Instalaciones de Animalario.