Grupos de investigación - ENFERMEDADES INFECCIOSAS

Laboratorio de Referencia e Investigación en Infecciones Virales Inmunoprevenibles. Grupo de Infecciones Víricas e Inmunidad en Enfermos Inmunodeprimidos


Página web del grupo: https://www.isciii.es/QueHacemos/Investigacion/EnfermedadesInfecciosas/Paginas/Detalle.aspx?ItemId=37

Investigador responsable: Pilar Pérez Romero. mpperez@isciii.es

Entidad: Instituto de Salud Carlos III. CNM

Investigadores:

  • Octavio Carretero Vicario. Doctorando UCM / Hospital 12 de Octubre
  • Estefanía García Ríos. CNM. ISCIII
  • Francisco Mancebo Pascual. Doctorando UCM
  • Clara Martín Martín. Doctoranda programa UNED/ISCIII
  • Marcos Nuévalos Guaita. Doctorando UCM

Las actividades de nuestro grupo se centran en el estudio de la infección viral y de la inducción de la respuesta inmune frente a infecciones víricas en individuos inmunocomprometidos, para el desarrollo de alternativas diagnósticas para predecir la infección y preventivas a través del desarrollo de vacunas. Trabajamos en las siguientes líneas de investigación:

  • Caracterización de la respuesta inmune (celular y humoral) protectora frente a la infección por citomegalovirus (CMV). Marcadores inmunológicos y virológicos de inducción de protección frente a la infección.
  • Desarrollo preclínico de vacunas (antígenos proteicos y vacunas de DNA) frente a la infección por CMV.
  • Desarrollo preclínico de anticuerpos monoclonales para la prevención y tratamiento de la infección por CMV.
  • Estudio de la respuesta de anticuerpos neutralizantes frente a CoV-2 y desarrollo de vacunas.

Characterization of the antibody immune response against CMV in transplant patients for vaccine design. IP: Pilar Pérez Romero. Organismo financiador: ISCIII-FIS. Duración:   2021-2024. Financiación: 176.000 €.  Nº de Expediente: P20CIII/0009     

Estudio de la cinética y reactividad de los anticuerpos neutralizantes en pacientes recuperados de COVID-19. IP: Pilar Pérez Romero. Organismo financiador:  Fundación Mutua Madrileña Consortium grant. Duración: 2020-2023. Financiación: 80.000 €

Caracterización del papel de los anticuerpos generados en ratones vacunados en la fagocitolisis de células infectadas por Acinetobacter baumannii, Klebsiella pneumoniae y Pseudomonas aeruginosa. IP: Pilar Pérez Romero.  Convenio de colaboración con Vaxdyn SL. Duración: 2022-2025. Financiación: 73.640 €

The European Society for Organ Transplantation Project CMV working group. Collaborative Study Group. Colaboración. Duración: desde 2019

SARSVAX-Development of a multiepitope vaccine for the prevention of COVID-19. Colaboración. Organismo financiador: Fundación La Caixa. Duración: 2020-2023. Financiación: 300.000 €. Nº de expediente: MVI 209/20

García-Ríos E, Rodríguez MJ, Terrón MC, Luque D, Pérez-Romero P. Identification and Characterization of Epithelial Cell-Derived Dense Bodies Produced upon Cytomegalovirus Infection. Vaccines (Basel). 2022 Aug 12;10(8):1308. doi: 10.3390/vaccines10081308.PMID: 36016196 

Mancebo FJ, Parras-Moltó M, García-Ríos E, Pérez-Romero P. Deciphering the Potential Coding of Human Cytomegalovirus: New Predicted Transmembrane Proteome. Int J Mol Sci. 2022 Mar 2;23(5):2768. doi: 10.3390/ijms23052768.PMID: 35269907 

Tajuelo A, Carretero O, García-Ríos E, López-Siles M, Cano O, Vázquez M, Más V, Rodríguez-Goncer I, Lalueza A, López-Medrano F, Juan RS, Fernández-Ruiz M, Aguado JM, McConnell MJ, Pérez-Romero P. Virus-Specific Humoral Immunity at Admission Predicts the Development of Respiratory Failure in Unvaccinated SARS-CoV-2 Patients. Front Immunol. 2022 Apr 25;13:878812. doi: 10.3389/fimmu.2022.878812. eCollection 2022.PMID: 35547738

Arroyo-Sánchez D, Cabrera-Marante O, Laguna-Goya R, Almendro-Vázquez P, Carretero O, Gil-Etayo FJ, Suàrez-Fernández P, Pérez-Romero P, Rodríguez de Frías E, Serrano A, Allende LM, Pleguezuelo D, Paz-Artal E. Immunogenicity of Anti-SARS-CoV-2 Vaccines in Common Variable Immunodeficiency. J Clin Immunol. 2022 Feb;42(2):240-252. doi: 10.1007/s10875-021-01174-5. Epub 2021 Nov 17.PMID: 34787773 

García-Ríos E, Leivas A, Mancebo FJ, Sánchez-Vega L, Lanzarot D, Aguado JM, Martínez-López J, Paciello ML, Pérez-Romero P. Isolation of Functional SARS-CoV-2 Antigen-Specific T-Cells with Specific Viral Cytotoxic Activity for Adoptive Therapy of COVID-19. Biomedicines. 2022 Mar 9;10(3):630. doi: 10.3390/biomedicines10030630.PMID: 35327433 

García-Ríos E, Nuévalos M, Mancebo FJ, Pérez-Romero P. Is It Feasible to Use CMV-Specific T-Cell Adoptive Transfer as Treatment Against Infection in SOT Recipients? Front Immunol. 2021 Apr 23;12:657144. doi: 10.3389/fimmu.2021.657144. eCollection 2021.PMID: 33968058 

García-Ríos E, Gata-de-Benito J, López-Siles M, McConnell MJ, Pérez-Romero P. Optimization of a Lambda-RED Recombination Method for Rapid Gene Deletion in Human Cytomegalovirus.Int J Mol Sci. 2021 Sep 29;22(19):10558. doi: 10.3390/ijms221910558.PMID: 34638896 

Sandonís V, García-Ríos E, McConnell MJ, Pérez-Romero P. Role of Neutralizing Antibodies in CMV Infection: Implications for New Therapeutic Approaches.

Trends Microbiol. 2020 Nov;28(11):900-912. doi: 10.1016/j.tim.2020.04.003. Epub 2020 May 21.PMID: 32448762 

Effect of Influenza Vaccination Inducing Antibody Mediated Rejection in Solid Organ Transplant Recipients. Cordero E, Bulnes-Ramos A, Aguilar-Guisado M, González Escribano F, Olivas I, Torre-Cisneros J, Gavaldá J, Aydillo T, Moreno A, Montejo M, Fariñas MC, Carratalá J, Muñoz P, Blanes M, Fortún J, Suárez-Benjumea A, López-Medrano F, Roca C, Lara R, Pérez-Romero P. Front Immunol. 2020 Oct 6;11:1917. doi: 10.3389/fimmu.2020.01917. eCollection 2020.PMID: 33123119 

Molina-Ortega A, Martín-Gandul C, Mena-Romo JD, Rodríguez-Hernández MJ, Suñer M, Bernal C, Sánchez M, Sánchez-Céspedes J, Pérez Romero P*, Cordero E. Impact of pretransplant CMV-specific T-cell immune response in the control of CMV infection after solid organ transplantation: a prospective cohort study. Clin Microbiol Infect. 2019 Jun;25(6):753-758. doi: 10.1016/j.cmi.2018.09.019. Epub 2018 Oct 5.PMID: 30292792 *corresponding

Manejo de técnicas aplicadas al estudio de poblaciones víricas. Entre las técnicas desarrolladas estarán las siguientes:

  • Mantenimiento y propagación de líneas celulares en cultivos para el estudio de la replicación viral.
  • Propagación y purificación de partículas y estructuras virales.
  • Producción y titulación de stocks virales.
  • Estudio de niveles de viremia por métodos cualitativos y cuantitativos.

Manejo de técnicas de Biología Molecular:

  • Aislamiento y amplificación de material genético para el diagnóstico virológico, por PCR convencional y cuantitativa.
  • Clonación de genes en plásmidos y secuenciación de material genético.
  • Manipulación del material genético mediante mutagénesis dirigida.
  • Transformación de bacterias en cultivo y selección de clones.
  • Monitorización de la expresión de proteínas, a través de Western blot, ELISA y luminometría.
  • Generación de mutantes por recombinación homóloga.
  • Generación de pseudovirus.

Manejo de técnicas de Biología Celular:

  • Mantenimiento y propagación de líneas celulares en cultivo.
  • Transfecciones de líneas celulares y seguimiento de la expresión de las proteínas intracelulares.

Manejo de técnicas de Inmunología:

  • Estimulación in vitro de células T.
  • Determinación de marcadores celulares por citometría de flujo.
  • Determinación de la respuesta inmune humoral: detección de anticuerpos por ELISA, y anticuerpos neutralizantes por microneutralización, ensayo de citotoxicidad mediada por anticuerpos.

Experimentación animal:

  • Manipulación y realización de procedimientos en ratones. Inmunización y monitorización de ratones, recogida y análisis de muestras de sangre y tejidos.
  • Para llevar a cabo estas actividades se dispone del espacio apropiado, incluyendo zonas de laboratorio con instalaciones de investigación y diagnóstico y espacios con el equipamiento necesario para la actividad del laboratorio de Virología.
  • El laboratorio incluye un área de seguridad habilitada para el cultivo de líneas celulares y manejo de virus, área de electroforesis de ADN y proteínas, y un área de manipulación y amplificación de DNA, entre otros.
  • Además, la planta de Virología está equipada con salas con puestos de trabajo con ordenadores así como áreas destinadas a reuniones de trabajo.
  • Asimismo, el Centro cuenta con servicios comunes de apoyo a la investigación necesarios para la investigación propuesta entre los que utilizaremos para la actividad propuesta los siguientes: Servicio de Citometría de flujo, Microscopía óptica, Microscopía electrónica, Servicio de Genómica e Instalaciones de Animalario.